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哪些因素影響著固相萃取回收率的結(jié)果

更新時(shí)間:2022-12-12點(diǎn)擊次數(shù):2703
  固相萃取儀將固相萃取的各個(gè)步驟有效的集成于一個(gè)平臺(tái),可實(shí)現(xiàn)整個(gè)固相萃取過程(活化、上樣、淋洗、干燥、洗脫)的全自動(dòng)操作,大大提高了樣品前處理的效率,將分析工作者從繁瑣的前處理工作中解脫出來,使樣品前處理更快捷、高效。
  SPE技術(shù)中萃取回收率衡量著檢測分析結(jié)果的準(zhǔn)確度,除了分析儀器帶來的誤差對(duì)回收率的影響之外,在固相萃取中還有以下因素影響著回收率。
  一、pH對(duì)固相萃取回收率的影響
  根據(jù)吸附機(jī)理,固相萃取主要分為正相保留模式、反相保留模式、離子交換作用模式。
  正相保留模式
  我們所使用的溶劑多為非極性的有機(jī)溶劑,pH對(duì)正相保留的影響并不是很大。
  反相保留模式
  調(diào)節(jié)pH的主要目的是使目標(biāo)化合物或者雜質(zhì)充分質(zhì)子化,保持分子狀態(tài)。以硅膠鍵合十八烷基碳鏈(C18小柱)為例,對(duì)于現(xiàn)在的商品化鍵合硅膠固相萃取小柱,其封尾率最多在70%左右,還有30%的硅羥基存在。當(dāng)化合物處于離子狀態(tài)時(shí),C18對(duì)化合物的容量因子會(huì)大大降低。
  當(dāng)分析部分堿性化合物時(shí),若萃取環(huán)境的pH同時(shí)使堿性目標(biāo)化合物和硅羥基解離帶相反電荷,按照正常的非極性洗脫方法是無法將目標(biāo)化合物洗脫出來的,因?yàn)閴A性目標(biāo)物與硅羥基之間形成了相反電荷之間的靜電吸引,必然導(dǎo)致回收率降低。當(dāng)分析部分酸性化合物時(shí),也要注意控制pH,例如,呈離子態(tài)的酸性除草劑在C18柱上基本不保留或很少保留。而在萃取前對(duì)樣品溶液進(jìn)行酸化,使其呈中性狀態(tài),就可以提高回收率。
  二、SPE柱容量對(duì)回收率的影響
  SPE小柱中填料的質(zhì)量影響著其吸附容量,吸附容量指的是在特定條件下,一定質(zhì)量的吸附劑能夠保留的化合物(包括目標(biāo)化合物和部分干擾物)的總質(zhì)量。常見規(guī)格吸附容量如下:
  硅膠基質(zhì)
  柱容量不超過SPE填料質(zhì)量的5%,例如100 mg/1mL的C18小柱可以保留5mg的化合物。
  聚合物基質(zhì)
  柱容量是硅膠基質(zhì)吸附劑的3倍,例如100 mg/1mL的BRP小柱可以保留15mg的化合物。
  離子交換吸附劑
  交換容量為0.25-1mmol/g,1mmol/g表示1g吸附劑能吸附1mmol的一價(jià)帶電物質(zhì)。
  所以在固相萃取中根據(jù)上樣量來選擇合適的填料規(guī)格至關(guān)重要,當(dāng)上樣量超過了吸附劑填料的吸附容量,目標(biāo)化合物就不再被吸附劑所保留,而是會(huì)隨樣品基質(zhì)流出SPE小柱,導(dǎo)致回收率下降。
  三、流速對(duì)固相萃取回收率的影響
  在固相萃取中,流速主要包括:活化流速、控制樣品通過SPE柱的流速和從SPE柱上洗脫目標(biāo)化合物的流速。
  活化流速
  活化主要是使吸附劑填料上官能團(tuán)充分舒展開來,提高對(duì)目標(biāo)化合物的吸附效率,從而提高萃取回收率。此外,還可以除去商品化小柱中可能存在的雜質(zhì)和干擾物。對(duì)流速的要求是不能太快,一般保持在1mL/min。
  樣品通過SPE柱的流速和從SPE柱上洗脫目標(biāo)化合物的流速也是兩個(gè)十分重要的因素。
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